RNA, a więc kwas rybonukleinowy, odgrywa bardzo istotną rolę w procesach genetycznych i komórkowych. Całkowite RNA obejmuje wszystkie rodzaje RNA obecne w komórce. Zaliczamy do nich chociażby mRNA, tRNA oraz rRNA. Izolacja całkowitego RNA jest bardzo ważnym krokiem w wielu badaniach biologii molekularnej, umożliwiając analizę ekspresji genów bądź profilowanie transkryptomu.
Izolacja całkowitego RNA – co warto wiedzieć?
Izolacja całkowitego RNA to proces, który wymaga precyzji i odpowiednich metodologii, aby uzyskać znakomitej jakości RNA, które jest wolne od zanieczyszczeń. Proces izolacji zazwyczaj zaczyna się od lizy komórek, w której używa się odpowiednich buforów, aby uwolnić RNA z wnętrza komórki. W dalszej kolejności, aby oddzielić RNA od pozostałych części komórkowych, stosuje się różne techniki oczyszczania. Może to być chociażby fenol-chloroform, metoda kolumnowa, a nawet magnetyczne separatory cząsteczkowe. Metoda fenol-chloroform jest bardzo dobrze znana i powszechnie stosowana ze względu na znakomitą wydajność, jednak jej minusem jest fakt, że wymaga pracy z toksycznymi odczynnikami i jest relatywnie czasochłonna. Metoda kolumnowa jest z kolei prostsza i szybsza, lecz będzie znacznie mniej wydajna w przypadku niektórych typów komórek. Znalezienie odpowiedniej metody jest niezbędne dla końcowego sukcesu, dlatego też warto dokładnie przeanalizować dostępne opcje. Jeśli interesuje Cię RNA całkowite i szeroko pojęte wyposażenie laboratoryjne, to sprawdź stronę: https://abo.com.pl/oczyszczanie-kwasow-nukleinowych/rna-calkowite.
Jak wybrać dobry zestaw do izolacji całkowitego RNA?
Wybór jakościowego zestawu do izolacji całkowitego RNA jest niezbędny dla uzyskania świetnej jakości materiału, który może być następnie używany w różnorodnych aplikacjach badawczych. Przy wyborze zestawu musisz zwrócić uwagę głównie na wydajność, czystość izolowanego RNA, a także jego koszt. Dzięki temu będziesz mieć pewność, że nabywasz solidny produkt. Wydajność zestawu odnosi się do ilości RNA, którą da się uzyskać z danej próbki. Wydajność ta jest niebywale istotna w przypadku pracy z próbkami o niewielkiej zawartości RNA. Mogą to być chociażby próbki z tkanek trudnych do izolacji czy małych ilości komórek. Wysoka wydajność jest niebywale ważna także w badaniach wymagających dużych ilości RNA. Czystość izolowanego RNA również nie jest bez znaczenia, zwłaszcza jeśli RNA ma być używane w newralgicznych technikach, takich jak RT-qPCR czy sekwencjonowanie RNA. Zestawy zapewniające wysoki poziom czystości eliminują zanieczyszczenia białkowe, DNA oraz inne czynniki, dlatego też są bardzo ważne. Pamiętaj o tym, że warto zainwestować w zestawy, które oferują najlepszy stosunek ceny do jakości, aby uzyskać niezawodne i powtarzalne wyniki. Dzięki temu prace laboratoryjne z pewnością dadzą zamierzone skutki.
Po co wykonuje się izolację całkowitego RNA?
Izolacja całkowitego RNA jest bardzo istotnym etapem w wielu różnych badaniach biologicznych i medycznych. Pozwala chociażby na analizę ekspresji genów, która jest obligatoryjna dla zrozumienia mechanizmów regulujących funkcjonowanie komórek czy tkanek. Analiza ekspresji genów może dostarczyć niebywale cennych informacji na temat aktywności genów w różnych warunkach. Warto pamiętać o tym, że profilowanie transkryptomu, a więc pełnego zestawu transkryptów RNA w komórce, jest również niebywale ważną aplikacją izolacji RNA. Transkryptomika pozwala na identyfikację i kwantyfikację wszystkich RNA w komórce, co jest bardzo istotne w badaniach nad genomiką funkcjonalną, różnicowaniem komórek, a także w badaniach nad nowotworami. Szerokie spektrum zastosowań izolacji całkowitego RNA sprawia, że jest ono obiektem zainteresowań tysięcy naukowców na całym świecie.
Artykuł sponsorowany
